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冰凍切片纖維蛋白(fibrin)卡斯塔萊斯(carstairs)染色

更新時間:2023-02-22  |  點擊率:702

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   冰凍切片纖維蛋白(fibrin)卡斯塔萊斯(carstairs)染色試劑盒產品說明書

(中文版)

 

主要用途

 

   冰凍切片纖維蛋白(fibrin)卡斯塔萊斯(carstairs)染色試劑是一種旨在使用三色染料(trichrome),分析和區分冰凍組織切片中的纖維蛋白和血小板成分而經典的技術方法。該技術經過精心改良傳統方法、成功實驗證明的。廣泛用于心血管系統的研究等。產品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩定,顯色清晰。

 

技術背景

 

纖維蛋白(fibrin),又稱為活化凝血因子IFactor Ia),是一種嗜酸性(acidophil)不溶性非球蛋白,來自于血漿中的纖維蛋白原(fibrinogen),經過凝血酶的水解后聚合而成。其主要功能包括信號傳導、血液凝結、血小板活化,以達到終止出血,即組織損傷引起血管和血小板開始反應,使纖維蛋白原轉化為纖維蛋白,形成網架,產生血凝塊而止血。纖維蛋白異常增多會導致血栓(thrombosis),而產生不足,引起出血,例如纖維蛋白原血癥dysfibrinogenaemia)。血小板(platelet),一種圓盤狀(flattened disc)的無核血液細胞,直徑4微米,厚度1微米,由骨髓巨核細胞產生,生命周期710天,通過肝臟和脾臟巨噬細胞排除。其功能主要為粘附、激活和聚集。其中與纖維蛋白聚集一起,構成凝。卡斯塔萊斯(carstairs染色技術主要用于區分纖維蛋白、血小板,以及膠原蛋白和紅細胞的染色技術。   

 

產品內容

 

   清理液(Reagent A           毫升

   固著液(Reagent B           毫升

   媒染液(Reagent C              毫升

   梅氏液(Reagent D                  毫升

   桔染液(Reagent E           毫升

   品紅液(Reagent F           毫升

   酸性液(Reagent G           毫升

   染色液(Reagent H           毫升

產品說明書              1

 

保存方式

 

保存在4℃冰箱里,避免光照;試劑具有腐蝕性,注意安全;有效保證3

 

用戶自備

 

小型玻璃染色缸:用于組織或切片處理的容器

培養箱或烘箱:用于樣品反應孵育

中性樹脂:用于切片封片

光學顯微鏡:用于切片染色后觀察分析

 

實驗步驟

 

1. 取出10片待測的5微米厚的冰凍組織切片

2. 小心加上xx微升   清理液(Reagent A在切片上,鋪滿整個切片樣品表面

3. 室溫下孵育2分鐘

4. 小心移去切片上的   清理液(Reagent A

5. 小心加入xx微升   固著液(Reagent B在切片上,鋪滿整個切片樣品表面

6. 室溫下箱孵育48小時96小時

7. 小心移去   固著液(Reagent B

8. 室溫下,小心將切片置入xx毫升   清理液(Reagent A中孵育2分鐘

9. 小心移去切片上的   清理液(Reagent A

10. 小心加入xx微升   媒染液(Reagent C在切片上,鋪滿整個切片樣品表面

11. 室溫下箱孵育510分鐘 

12. 小心移去   媒染液(Reagent C

13. 室溫下,小心將切片置入xx毫升   清理液(Reagent A中孵育2分鐘

14. 小心移去切片上的   清理液(Reagent A

15. 小心加入xx微升   梅氏Reagent D在切片上,鋪滿整個切片樣品表面

16. 室溫下孵育5分鐘

17. 小心移去   梅氏Reagent D

18. 室溫下,小心將切片置入xx毫升   清理液(Reagent A中孵育5分鐘

19. 小心移去切片上的   清理液(Reagent A

20. 小心加入xx微升   桔染液(Reagent E在切片上,鋪滿整個切片樣品表面

21. 室溫下孵育3060分鐘 

22. 小心移去   桔染液(Reagent E

23. 小心加入xx微升   清理液(Reagent A在切片上,鋪滿整個切片樣品表面

24. 小心移去切片上的   清理液(Reagent A

25. 小心加入xx微升   品紅液(Reagent F在切片上,鋪滿整個切片樣品表面

26. 室溫下孵育15分鐘 

27. 小心移去   品紅液(Reagent F

28. 室溫下,小心將切片置入xx毫升   清理液(Reagent A中孵育2分鐘

29. 小心移去切片上的   清理液(Reagent A

30. 小心加入xx微升   酸性液(Reagent G在切片上,鋪滿整個切片樣品表面

31. 室溫下孵育2分鐘,或直至肌肉呈現紅色(注意:可以鏡下觀察 

32. 小心移去切片上的   酸性液(Reagent G

33. 室溫下,小心將切片置入xx毫升   清理液(Reagent A中孵育2分鐘

34. 小心移去切片上的   清理液(Reagent A

35. 小心加上xx微升    染色液Reagent H在切片上,鋪滿整個切片樣品表面

36. 室溫下孵育10分鐘至2小時,或直至膠原纖維顯示藍色(注意:可以鏡下觀察

37. 小心移去切片上的   染色液Reagent H

38. 室溫下,小心將切片置入xx毫升   清理液(Reagent A中孵育2分鐘

39. 小心移去切片上的   清理液(Reagent A

40. 放上蓋玻片或封片(中性樹脂)

41. 即刻在一般光學顯微鏡下觀察:

 

固著時間

48小時以上

48小時以內(包括48小時)

纖維蛋白

亮紅色

橘紅色

血小板

灰藍色或

淡灰色

膠原蛋白

亮藍色

亮藍色

肌肉

紅色

紅色

紅細胞

黃色或橘黃色

紅色、綠色或黃色

血小板+纖維蛋白重疊

紫色

淡紫色

 

注意事項

 

1. 本產品為50次操作

2. 操作時,須戴手套

3. 試劑具有腐蝕性,注意操作安全 

4. 建議使用玻璃染色缸

5. 每次更換試劑溶液時,保持切片面基本晾干

6. 試劑溶液在切片表面時,避免有氣泡存在,同時確保鋪滿切片表面

7. 整個操作,在避光狀態下進行

8. 染色完成后,即刻進行光學顯微鏡觀察 

9. 樣品染色后保存,避免光照

10. 本公司提供系列纖維蛋白染色試劑產品

 

質量標準

 

1. 本產品經鑒定性能穩定

2. 本產品經鑒定顯色清晰

 

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